Skip to content

Ludzki metapneumowirus i choroba dolnego odcinka dróg oddechowych u innych zdrowych niemowląt i dzieci ad

1 miesiąc ago

490 words

Podczas wizyt w przypadku choroby objawy i objawy u dzieci rejestrowano w standardowej postaci klinicznej, informacje poddawano przeglądowi i wprowadzano do bazy danych, a próbki do płukania nosa uzyskano i hodowano w celu wykrycia wirusów. Wszystkie badania zostały przeprowadzone za zgodą Komitetu Ochrony Osób z Centrum Medycznego Uniwersytetu Vanderbilt. Rodzice wyrazili pisemną świadomą zgodę. Definicje przypadków
Lekarz postawił diagnozę w momencie wizyty dziecka. Świszczący oddech, rzężenie, przyspieszony oddech i duszność uznano za objawy zakażenia dolnych dróg oddechowych. Zapalenie oskrzelików definiowano jako ostrą chorobę układu oddechowego, charakteryzującą się wyciekaniem z nosa, kaszlem i rozlanymi świniami i rzęskami, z zagęszczeniem okołobronkowym i nadmiernym wyprostowaniem na radiogramie klatki piersiowej, jeśli taki został uzyskany. Zapalenie płuc definiowano jako duszność u pacjenta z ogniskowymi ogniskami lub zmniejszonymi odgłosami oddechu i obecnością ogniskowego nacieku na radiogramie klatki piersiowej. Zapalenie krtani i tchawiczego zapalenia stawów (zadu) definiowano jako ostrą infekcję dolnych dróg oddechowych, charakteryzującą się chrypką, kaszlem i trądem. Próbki do mycia nosa do hodowli wirusowej otrzymano od dzieci z jednym z następujących wskazań: zakażeniem górnych dróg oddechowych, któremu towarzyszyła temperatura powyżej 38,4 ° C, ostre zapalenie ucha środkowego lub objawy zakażenia dolnych dróg oddechowych. Próbki trzymano na lodzie i natychmiast inokulowano je na monowarstwy komórek, w tym ludzką nerkę noworodków, ludzkie zarodkowe płuca, HEp-2, nerkę rezus-małp i (podczas sezonu grypowego) nerkę Madin-Darby. Próbki przemywania nosowego szybko zamrażano i przechowywano w temperaturze -70 ° C.
Grupy badawcze
Dzieci, które przeszły z kliniki na opiekę społeczną, zostały zastąpione noworodkami, aby utrzymać populację około 200 dzieci. W okresie studiów od 1976 do 2001 roku 2009 obserwowano dzieci w klinice. Badaliśmy próbki od pacjentów, u których rozpoznano górną lub dolną infekcję dróg oddechowych, u których wcześniej występowały negatywne kultury wirusowe. Testowaliśmy również próbki od pacjentów, którzy mieli infekcję dolnych dróg oddechowych z hodowlami, które były pozytywne dla wirusów innych niż metapneumowirusy. Próbki od dzieci bez objawów oddechowych, zebrane bezpośrednio przed włączeniem do prób szczepionkowych, przebadano na obecność metapneumowirusa u ludzi w celu oceny częstości bezobjawowej infekcji.
Analiza molekularna
Próbki do przemywania nosa rozmrożono w temperaturze 37 ° C i RNA wyekstrahowano przy użyciu zestawu QIAamp Viral RNA kit (Qiagen). Odwrotną transkrypcję (RT) przeprowadzono przy użyciu losowych starterów heksamerowych. Testy reakcji łańcuchowej polimerazy (PCR) przeprowadzono w dwóch powtórzeniach. Startery amplifikowały fragment o długości 170 pz genu L (polimerazy), który jest wysoce konserwatywny wśród izolatów ludzkiego metapneumowirusa.4 Produkty oczyszczono na żelu i sklonowano w komercyjnym wektorze plazmidowym (Promega). Sekwencje obu nici komplementarnego DNA z insertu określono na przyrządzie ABI 377 Prism w Vanderbilt DNA Sequencing Core Laboratory. Próbki uznano za pozytywne, jeśli miały unikalną sekwencję lub wyniki obu testów PCR były pozytywne
[hasła pokrewne: Corsodyl, busulfan, amiodaron ]
[przypisy: nasiadówka z rumianku, limitki aflofarm, climagyn ]

0 thoughts on “Ludzki metapneumowirus i choroba dolnego odcinka dróg oddechowych u innych zdrowych niemowląt i dzieci ad”